Расширенное описание Ремдесивира как широкого

Jul 12, 2023

Научные отчеты, том 13, Номер статьи: 3131 (2023) Цитировать эту статью

2110 Доступов

2 цитаты

13 Альтметрика

Подробности о метриках

Ремдесивир (GS-5734; VEKLURY) представляет собой однодиастереомерное монофосфорамидатное пролекарство аналога аденозина (GS-441524). Ремдесивир поглощается клетками-мишенями и метаболизируется в несколько стадий с образованием активного нуклеозидтрифосфата (GS-443902), который действует как мощный ингибитор вирусных РНК-зависимых РНК-полимераз. Ремдесивир и GS-441524 обладают противовирусной активностью против множества РНК-вирусов. Здесь мы расширяем оценку противовирусной активности ремдесивира на членов семейств Flaviviridae, Picornaviridae, Filoviridae, Orthomyxoviridae и Hepadnaviridae. Используя клеточные анализы, мы показываем, что ремдесивир может ингибировать инфекцию флавивирусов (таких как вирусы денге 1–4, Западного Нила, желтой лихорадки, вирусы Зика), пикорнавирусов (таких как энтеровирус и риновирус) и филовирусов (таких как различные вирусы Эбола, Изоляты вирусов Марбурга и Судана, включая новые географические изоляты), но неэффективен или значительно менее эффективен против ортомиксовирусов (вирусов гриппа А и В) или гепаднавирусов В, D и Е. Кроме того, ремдесивир не проявляет антагонистического эффекта при комбинированном применении. с фавипиравиром, другим противовирусным аналогом нуклеозидов широкого действия, и имеет минимальное взаимодействие с группой сопутствующих препаратов. Наши данные также подтверждают, что ремдесивир является противовирусным агентом широкого спектра действия, который потенциально может удовлетворить многочисленные неудовлетворенные медицинские потребности, в том числе связанные с готовностью к противовирусной пандемии.

Ремдесивир (RDV; GS-5734; VEKLURY), первый противовирусный препарат, одобренный FDA для лечения COVID-19, представляет собой однодиастереомерный монофосфорамидатный пролекарство аналога аденозина (GS-441524). После поглощения клетками RDV метаболизируется в несколько стадий с образованием активного нуклеозида 5'-трифосфата (TP), мощного ингибитора множества вирусных РНК-зависимых РНК-полимераз. РДВ обладает широким спектром активности против многих РНК-вирусов в культуре клеток, включая коронавирусы (SARS-CoV-2, SARS-CoV и MERS-CoV)1,2,3,4,5,6,7, пикорнавирусы (энтеровирус 71). [EV71] и вирус Коксаки B3)8, филовирусы (вирус Эбола [EBOV], суданский вирус [SUDV], вирус Бундибугио, вирус Марбург [MARV])9,10,11, пневмовирусы (респираторно-синцитиальный вирус [RSV])10,11 ,12 и парамиксовирусы (вирус Нипах [NiV], вирус кори и вирус Хендра)13,14. РДВ обладает умеренной активностью в отношении вируса Ласса и вируса Хунин семейства Arenaviridae, а также вируса клещевой геморрагической лихорадки Алхурма, вируса лесной болезни Кьясанур, вируса омской геморрагической лихорадки и вируса клещевого энцефалита семейства Flaviviridae10,13. РДВ обладает минимальной противовирусной активностью в отношении вируса чикунгунья и вируса венесуэльского лошадиного энцефалита семейства Togaviridae, вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) из семейства Retroviridae, вируса лихорадки Рифт-Валли семейства Phenuiviridae, вируса конго-крымской геморрагической лихорадки Семейство Nairoviridae и вирус везикулярного стоматита семейства Rhabdoviridae10,13. Причины изменений в профиле активности неизвестны, но, вероятно, отражают тонкие различия в активном центре вирусных РНК-зависимых РНК-полимераз15.

В этом исследовании мы расширили оценку противовирусной активности РДВ на других членов семейств Flaviviridae, Picornaviridae, Filoviridae (с новыми штаммами), Orthomyxoviridae и Hepadnaviridae. Для обеспечения готовности к пандемии, в случае, если может потребоваться объединение нескольких препаратов для усиления противовирусной активности и, следовательно, эффективности, мы также показываем отсутствие антагонизма между РДВ и фавипиравиром, другим одобренным противовирусным аналогом нуклеозидов широкого спектра действия, в противовирусных анализах против двух репрезентативных филовирусов. Кроме того, мы продемонстрировали отсутствие антагонизма между RDV и группой сопутствующих препаратов, обычно используемых в регионах, эндемичных по SUDV и MARV.

Эффективность RDV против RSV и различных коронавирусов in vitro тщательно изучена1,3,4,5,6,7,12. Мы подтверждаем, что RDV эффективен против эндемичных коронавирусов OC43 и 229 E со значением EC50 0,067 мкМ в клетках Huh7 и 0,093 мкМ в клетках H1 HeLa соответственно (таблица 1). В анализах клеточных инфекций RDV ингибировал энтеровирусы 68D и 71 со значениями EC50 0,050 и 0,140 мкМ соответственно. Активность RDV против риновирусов серотипов A и B варьировала от значений EC50 от 0,385 до 0,750 мкМ в клетках H1 HeLa. И наоборот, RDV был неактивен против гриппа A и B (EC50 > 50 мкМ; таблица 1).

30 µM, respectively19. In this study, RDV activity against flaviviruses was evaluated in cell-based infectious assays. Huh-7 cells were treated with increasing concentrations of compound and subsequently exposed to DENV 1–4, zika virus (ZIKV), YFV, or Japanese encephalitis virus (JEV) expressing a nano luciferase reporter protein. Luciferase activity was measured at the assay endpoint as an output of virus infection. Cell viability was tested on the same cell type using ATP-based luminescent assay to measure cytotoxicity. RDV reduced infection by all of these flaviviruses, with highest potency against DENV (EC50 range = 0.12–0.23 μM; Table 1) and lowest potency against YFV (EC50 = 1.06 μM; Table 1). RDV antiviral activity against WNV was evaluated in a similar manner with the exception that virus infection rates were measured via plaque assays of culture media at the assay endpoint. RDV was a potent inhibitor of WNV infection (EC50 = 0.05 μM; Table 1)./p> 5 µM. In addition, RDV was inactive against hepatitis E virus (GT3-Kernow C1 p6/Luciferase replicon) at concentrations up to 1 µM. Higher concentrations were not attempted as cytotoxicity was observed at concentrations of approximately 4 µM./p> 10 indicates synergy, − 10 to + 10 indicates additivity, and > 10 indicates antagonism (Fig. S1). The combination of the compounds showed no evidence of cytotoxicity, even at the highest concentrations of both compounds. /p> 5-folds; (2) drugs that showed antiviral activity against SUDV (efavirenz, lopinavir, lumefantrine, and ceftriaxone were tested alone, or in combination with RDV (Table 3). None of these drugs showed antagonistic effect when tested against SARS-CoV-2 in combination with RDV. Enhanced cytotoxicity was observed for combinations of RDV with efavirenz and atovaquone at 41 and 22.6 µM, respectively. These compounds had similar cytotoxicity when tested alone (CC50 ≈ 14–28 µM for efavirenz and CC50 ≈ 8–17 µM for atovaquone)./p>

100 × EC50 as a positive control (100% inhibition). Plates were incubated for 3 days at 37 °C in an atmosphere of 5% CO2 and 85% humidity./p>

Предыдущий: Обзор задних фонарей Knog Blinder Следующий: Мультиплатформенный анализ выявляет различные факторы системного патогенеза у взрослых и детей с тяжелым острым COVID

Отправить запрос

Отправлять